什么是微量蛋白质组学(microproteomics)?
微量蛋白质组学(microproteomics)是现代蛋白质组学的重要前沿分支,其核心目标是从微量生物样本中最大限度地鉴定和定量蛋白质。它彻底打破了传统蛋白质组学对样本量的严苛限制,专为临床珍贵标本、穿刺活检、脑脊液、细胞亚群乃至单细胞等“不可再生”的微量样本场景而生,为生命科学研究与精准医疗提供了强大的技术支撑。
核心技术优势:将样本需求降至ng级
传统蛋白质组学通常需要几十至几百微克蛋白,而微量蛋白质组学通过三大核心技术壁垒,成功将样本需求量降至1μg以下甚至ng级:
高灵敏度质谱赋能:依托新一代高灵敏质谱仪,凭借超高分辨率和卓越的离子传输效率,精准捕获并检测低丰度蛋白信号。
微型化前处理与低吸附耗材:全面采用低吸附枪头与微量离心管,从源头减少管壁吸附造成的蛋白损失;结合纳升液相色谱(nanoLC),在nL/min级别流速下配合长色谱柱,实现极微量肽段的高效分离。
载样与富集优化:运用微型固相萃取(StageTips)技术进行除盐富集,大幅提升肽段上样效率,确保微量样本数据的深度与可靠性。

微量蛋白质组学检测流程
突破性应用领域:解锁珍贵样本的无限可能
临床穿刺与肿瘤微组织分析:针对手术微切组织或立体定向活检获取的极少量组织,深度分析肿瘤异质性、侵袭相关蛋白及耐药机制,为个性化靶向治疗提供依据。
脑脊液蛋白动态监测:仅需几十微升脑脊液,即可精准检测蛋白变化,有效评估胶质瘤、脑外伤或蛛网膜下腔出血后的病情进展与治疗反应。
细胞外囊泡(EVs)无创液体活检:从血浆、脑脊液或培养上清中分离EVs并提取微量蛋白,构建无创液体活检新范式,寻找高特异性疾病标志物。
神经干细胞与类器官研究:针对神经干细胞或类器官的少量样品,精准捕捉神经分化过程中的蛋白动态变化,对比药物处理前后的分子差异。
单细胞蛋白质组学延伸:在微量蛋白组学基础上进一步突破,深入分析胶质瘤微环境等复杂体系中不同细胞亚群的蛋白表达,揭示细胞异质性。
微量蛋白质组学(microproteomics)送样建议:
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样本类型 |
建议送样量 |
预处理及保存 |
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细胞类 |
原代细胞 |
≥1000 cells |
1)400g-1000g离心10min收获细胞,弃上清;
2)用预冷的PBS小心洗涤片状沉淀物2次,置于冰上;
3)低速离心去除上清,液氮速冻,-80℃保存。 |
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组织类 |
临床活检穿刺组织 |
≥1mg |
建议离体后PBS清洗血液,-80℃保存。 |
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类器官 |
≥1mg |
用PBS清洗三遍,以沉淀形式置于EP管中,封口膜包好,防止爆开。 |
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体液类 |
房水、玻璃体液 |
≥10μL |
1000g-2000g 离心10min(或使用 0.22μm滤膜过滤),取上清,-80℃保存。 |
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脑脊液、淋巴液 |
≥10μL |
1000g-2000g离心5min(或使用 0.22μm滤膜过滤),取上清,-80℃保存。 |
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外泌体类 |
外泌体 |
≥50μL |
自行抽提外泌体后(保存于PBS中)自行进行WB,NTA等指标检测并进行定量,浓度不低于0.1μg/μL |
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